Biochimica e chimica clinica
Cosa testa la prova
Il dominio copre struttura e funzione di proteine, enzimi, metabolismo, marcatori biochimici, matrici biologiche, interferenze analitiche e qualità in chimica clinica. Le domande richiedono di interpretare un dato biologico tenendo conto della variabilità preanalitica e analitica.
Regole e concetti chiave
- Michaelis-Menten: v = Vmax[S]/(Km+[S]); quando [S] = Km, v = 0,5 Vmax.
- L'attività enzimatica si esprime in U/L (1 U = 1 µmol di substrato convertito al minuto) e dipende da temperatura e pH.
- Emolisi, lipemia, bilirubina e farmaci possono interferire per assorbanza, diluizione o reattività crociata.
- Gli intervalli di riferimento dipendono da popolazione, metodo e preanalitica; non sono valori soglia universali.
- Nel point-of-care serve un controllo qualità specifico e una verifica periodica della concordanza con il laboratorio centrale.
Esempio svolto
Un saggio enzimatico ha Km = 0,5 mmol/L. A [S] = 0,5 mmol/L la velocità è 0,5 Vmax; a [S] = 5 mmol/L è 5/(5+0,5) = 0,91 Vmax. Se il metodo assume substrato saturante ma il campione è molto diluito, la velocità misurata sottostima l'attività. La conclusione operativa è verificare la concentrazione di substrato nel saggio e la linearità del metodo prima di refertare.
Trappole che costano punti
Confondere concentrazione e attività enzimatica; ignorare la temperatura di incubazione; refertare un campione emolizzato senza valutarne l'effetto; usare intervalli di riferimento di un altro metodo; trattare un risultato POCT come equivalente senza verifica di concordanza.