HPLC 시스템적합성 실패 상태에서의 함량 판정

계산

• 합계 = 1,254,300+1,268,910+1,240,570+1,271,450+1,262,880+1,295,340 = 7,593,450
• 평균 = 7,593,450 / 6 = 1,265,575
• 편차: −11,275 / +3,335 / −25,005 / +5,875 / −2,695 / +29,765
• 편차 제곱합 = 1,691,231,750 → 분산(n−1=5) = 338,246,350 → 표준편차 ≈ 18,392
• RSD = 18,392 / 1,265,575 × 100 ≈ 1.45%

판정

항목	기준	결과	판정
반복주입 RSD	≤2.0%	1.45%	적합
이론단수	≥2,000	3,200	적합
꼬리인자	≤1.5	1.92	부적합

시스템적합성은 모든 항목을 동시에 만족해야 성립하므로 이 분석 시스템은 부적합이다. 따라서 함량 98.7%는 '규격 범위 안에 있다'는 사실과 무관하게 규제 목적 데이터로 사용할 수 없다. 꼬리인자 1.92는 피크가 비대칭임을 뜻하고, 이는 적분 면적의 정확도와 뒤쪽 미확인 불순물과의 분리능에 직접 영향을 준다. 즉 측정값 자체의 신뢰성이 확보되지 않은 상태이므로 적합 판정은 성립하지 않는다.

단서 해석 같은 컬럼으로 원료 B에서 꼬리인자 1.05가 나왔다는 점은 컬럼 자체의 결함 가능성을 낮춘다. 반면 시료 농도가 표준품의 2배라는 점은 과부하 가능성을 직접 시사한다.

원인 우선순위와 확인 방법

1. 시료 과농도/주입량 과다(가장 먼저 배제): 컬럼 과부하 시 피크가 비대칭이 된다. 시료를 이동상으로 희석하거나 주입량을 줄여 재주입.
2. 이동상 pH·조성 오차: 완충액 pH가 분석물 pKa 근처면 이온화 상태가 흔들려 실란올과의 2차 상호작용이 커진다. pH 재측정, 완충액 재조제, 유기용매 비율 확인.
3. 염기성 화합물과 잔여 실란올 상호작용: 신규 컬럼이라도 컨디셔닝 부족이면 발생. 규정된 컬럼 세척·평형 절차 수행.
4. 시스템 요인: 주입부 dead volume, 인젝터 씰 마모, 검출기 셀 오염, 컬럼 온도 안정화 부족.
5. 컬럼 오염: 앞쪽 용매 피크와 뒤쪽 불순물 피크가 관찰되었으므로 이전 시료 잔류 가능성도 확인.

조치 순서 시료 희석/주입량 조정 → 이동상 재조제 및 pH 확인 → 컬럼 재평형 후 재주입 → 시스템 누출·dead volume 점검 → 필요 시 컬럼 교체. 각 변경은 밸리데이션된 범위 안에서만 하고, 변경 사항과 결과를 기록한다. 조정 후 시스템적합성을 다시 확인하여 모두 통과할 때만 재분석에 들어간다.

판단 시스템적합성 실패 상태의 데이터로 규격 적합을 선언하는 것은 측정 불확실성을 무시한 결론이며, 데이터 무결성 위반에 해당한다. 규격(95.0~105.0%)은 '적합한 시스템으로 측정한 값'에 적용되는 기준이다.

절차

1. 기록: 시스템적합성 실패 사실, 계산값, 크로마토그램을 원본 그대로 보존한다. 실패 데이터를 폐기하거나 재주입분만 남기는 행위는 금지된다.
2. 원인 조사: SOP에 따라 기기, 이동상, 컬럼, 시료 조제, 계산 오류를 순서대로 점검하고 조사 보고서를 작성한다.
3. 재시험 계획: QA 승인 하에 재시험 계획서를 만들고, 시스템적합성을 먼저 통과시킨 뒤 재분석한다. 결과는 최초 결과와 함께 보고한다.
4. 불순물 평가: 꼬리인자 1.92는 주성분과 뒤쪽 불순물의 분리능에 영향을 주므로, 분리능이 1.5 이상인지 확인해야 한다. 분리능이 확보되지 않으면 불순물 정량치도 신뢰할 수 없다.
5. 검량선 적합성: 상관계수 0.995가 사내 기준(예: 0.999 이상)을 충족하는지 확인한다.
6. 결론 문서화: '분석 무효, 재분석 필요'로 정리하고, 상신은 재분석 결과가 시스템적합성을 통과한 뒤에 한다.